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            酵母培養基中用胰蛋白胨代替蛋白胨可以嗎

            時間:2020-09-14瀏覽數:1158

            考察兩種培養及成分能否相互替換,在不同的培養生物條件下得出的結果是不同的,我們要以實際的實驗數據來說話。

            為使酪酸梭狀芽孢桿菌的菌體濃度和芽孢轉化率都達到較大,我們對其培養條件進行了研究。結果表明:葡萄糖1.0%、胰蛋白胨1.0%、酵母膏0.5%、牛肉浸膏0.3%,適量合適的無機鹽類,接種前活化菌種,接種量10%,培養36h可獲較大菌體濃度和芽孢轉化率。

            酪酸梭狀芽孢桿菌(clostridium butyricum)是一種革蘭氏陽性厭氧內生芽胞桿菌。芽孢巨大,生成芽孢后或一端膨大成鼓錘狀,或中部膨脹成紡錘狀或梭狀。其對人畜;可抑制腸道有害菌,促進有益菌生長;能減少腸內氨、胺含量(這兩種物質會損害肝功能);產生多種維生素,如維生素K等;產生多種酶類,提高飼料利用率,促進動物生長。作為微生態制劑功效顯著,并能與抗生素配伍使用。

            目前廣泛應用的非芽孢類活菌制劑(如乳酸菌)普遍存在保存期短,活性不穩定的缺點,給實際應用帶來很多困難,這個問題在動物用微生態制劑上尤為明顯。由于動物用微生態制劑的補充是通過飼料添加途徑,而在此過程中不可避免的要經歷某些高溫或特殊pH的生產、運輸及飼喂環節。而非芽孢類活菌制劑在這種情況下,其活性會大大降低,進而嚴重影響使用效果。因此本試驗的目的就是要在獲得酪酸菌較大菌體得率的同時提高芽孢轉化率,以提高其對各種惡劣的環境因素的抗性,延長制劑保存期,穩定活性。

            為了獲得較高的酪酸菌菌體得率和芽孢轉化率,我們對培養基成分,接種量,培養時間,菌種優化方法進行了研究,并對生長過程進行48h觀測,得出了生長過程中菌體濃度、 pH、芽孢形成率等因素的變化規律和相互關系。并在100L發酵罐上進行了擴大培養,效果良好。

            1 材料與方法

            1.1 菌種

            JSMCB,江蘇省微生物研究所保藏。

            1.2 試劑

            葡萄糖、蔗糖、乳糖、可溶性淀粉、胰蛋白胨、酵母膏、牛肉浸膏、NaCl、(NH4)2SO4、K2HPO4、MgSO4、MnSO4、NaHCO3、CaCO3,孔雀綠染液,蕃紅染液。以上試劑均為國產分析純試劑。

            1.3 基礎培養基

            葡萄糖0.5%、牛肉蛋白胨1.0%、酵母膏0.5%、NaCl 0.2%、K2HPO4 0.4%、CaCO3 0.1%。

            1.4 器材

            TH-GB-403型*凈工作臺,江蘇省無錫縣空氣凈化設備廠;PYX-DHS-40X恒溫培養箱,上海市躍進醫療器械一廠;123MB-1型光學顯微鏡,Nikon;XB-K-25型血球計數板,上海醫樂醫用光學儀器廠。

            1.5 培養方法

            液體深層靜置培養:250ml三角瓶裝液量200ml,于37℃恒溫培養箱中靜置培養。

            1.6 檢測方法

            菌數測定用血球計數法、菌體形態用芽孢染色法[4]染色后于顯微鏡下觀察。

            2 結果與分析

            2.1 培養基成分試驗

            2.1.1 碳、氮源配比試驗

            調節碳、氮源種類和添加量,為菌體生長提供足夠的營養,從而使菌體濃度達到較大。

            2.1.1.1 不同碳源對菌體濃度的影響

            分別以1.0%葡萄糖,3.0%蔗糖,3.0%乳糖,3.0%可溶性淀粉為碳源,代替基礎培養基中0.5%的葡萄糖,基礎培養基中其它成分不變,對酪酸菌進行液體深層靜置培養。培養24h,結果見表1。試驗結果表明以葡萄糖為碳源培養效果較好。


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